fa مقاله علمی-پژوهشی: استفاده از روش Real-Time PCR به منظور شناسایی بیماری‌‌های ویروسی اخطار کردنی (IPN، VHS و IHN) در مولدین قزل‌آلای رنگین کمان نسل پایه ماهیان عاری از عوامل بیماریزای خاص (SPF) بهداشت و بيماريهاي آبزيان بهداشت بيماريها پژوهشي Research <span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف از اجرای این پژوهش، شناسایی عوامل مختلف بیماری&rlm;زا ویروسی ماهی قزل&rlm;آلای رنگین کمان با استفاده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-Time PCR</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> به منظور تشخیص سریع و دقیق بیماری&rlm;های ویروسی شایع </span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">شامل </span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">بیماری نکروز عفونی بافت خونساز (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">IHN</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">)، بیماری سپتی&rlm;سمی هموراژیک ویروسی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">VHS</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">) و بیماری نکروز عفونی پانکراتیک (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">IPN</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">) در جمعیت </span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">مولدین نسل پایه</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> نگهداری شده در طرح کلان ملی تولید ماهیان عاری از بیماری&rlm;های خاص </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SPF)</span></span> <span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">بوده است. بدین منظور از مولدین مزارع منتخب مورد تایید سازمان دامپزشکی کشور در استان‌‌های مازندران، کهگیلویه و بویراحمد و آذربایجان غربی نمونه‌‌برداری شد. نمونه‌‌برداری از ماهیان در رده‌‌های سنی متفاوت و از اندام‌‌های مختلف صورت پذیرفت و نمونه‌‌ها بلافاصله در ازت مایع منجمد شدند. استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">RNA</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> و آزمایشات </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-Time PCR</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> با استفاده از پرایمرهای مربوط به ویروس‌‌های مورد نظر انجام شد.</span></span> <span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج حاصل</span></span> <span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">از آزمایش ماهیان سالم و مشکوک به بیماری&rlm;های ویروسی به روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-Time PCR</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;">، وجود ویروس&rlm;های بیماری&rlm;زای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">VHS</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">IHN</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> را در تعدادی از مزارع منتخب نشان داد در حالیکه ویروس بیماری&rlm;زای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">IPN</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> در نمونه‌‌ها شناسایی نشد. بر اساس نتایج حاصل از این بررسی بنظر می‌‌رسد که روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-Time PCR</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> می‌تواند به عنوان روش تشخیصی سریع در آزمایش&rlm;های غربال&rlm;گری بیماری&rlm;های ویروسی قزل&rlm;آلای رنگین کمان و نیز روش مکمل تشخیص ویروس&rlm;های بیماری&rlm;زا در ادامه آزمایش&rlm;های متداول کشت بافت</span></span><span style="font-family:B Compset;"><span style="font-size:11.0pt;"> مورد استفاده قرار گیرد. </span></span> The aim of this study was to identify different virulence pathogens using Real-Time PCR method for rapid and accurate detection of common viral diseases including Infectious Hematopoietic Necrosis (IHN), Viral Hemorrhagic Septicemia (VHS) and Infectious Pancreatic Necrosis disease (IPN) in rainbow trout broodstock have been the main generation of reproductive populations maintained in the national plan for production the Specific Pathogen Free (SPF) fish. For this purpose, sampling was carried out on selected farms approved by the National Veterinary Organization in the provinces of Mazandaran, Kohgiluyeh and Boyerahmad and West Azerbaijan. Sampling of fish was done in different age groups and organs and was immediately frozen in liquid nitrogen. RNA extraction and Real-Time PCR experiments were performed using primers for the diseases. The results obtained using Real-Time PCR testing of healthy and suspected viral fishes showed the presence of VHS and IHN viruses in a number of selected farms, while the pathogenic virus IPN not detected. Based on the results of this study, it seems that Real-Time PCR can be used as a rapid diagnostic method in screening tests for rainbow trout viruses and as a complementary method for virus detection in routine tissue culture experiments. قزل‌آلای رنگین کمان, بیماری‌های ویروسی, Real-Time PCR, IPN, IHN, VHS Rainbow trout, Viral diseases, Real-Time PCR, IPN, IHN, VHS 47 59 http://isfj.ir/browse.php?a_code=A-10-298-2&slc_lang=fa&sid=1 M.J. Zorriehzahra سید جلیل ذریه زهرا Zorrieh@yahoo.com 100319475328460030428 100319475328460030428 No مؤسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران Mahtab Yarmohammadi مهتاب یارمحمدی mahtabyarmohammadi@gmail.com 100319475328460030429 100319475328460030429 Yes مؤسسه تحقیقات بین‌‌المللی تاسماهیان دریای خزر، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، رشت، ایران D. Hosseini سید داود حسینی hosseinida@yahoo.com 100319475328460030430 100319475328460030430 No مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، شعبه منطقه مرکزی (اراک)، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران M Pourkazemi محمد پورکاظمی mpourkazemi17@yahoo.com 100319475328460030431 100319475328460030431 No مؤسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران R. kazemi رضوان اله کاظمی rezkazemi2000@yahoo.com 100319475328460030432 100319475328460030432 No مؤسسه تحقیقات بین‌‌المللی تاسماهیان دریای خزر، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، رشت، ایران A. Sepahdari ابوالفضل سپهداری asepahdari@yahoo.com 100319475328460030433 100319475328460030433 No مؤسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران M. Ghasemi محدث قاسمی mohades@yahoo.com 100319475328460030434 100319475328460030434 No پژوهشکده آبزی پروری آبهای داخلی، موسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، بندرانزلی، ایران S. Kakoolaki شاپور کاکولکی bsh443@gmail.com 100319475328460030435 100319475328460030435 No مؤسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران M.R. Mehrabi محمدرضا مهرابی drmehrabi@gmail.com 100319475328460030436 100319475328460030436 No مؤسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران A. Shenavarmasooleh علیرضا شناور ماسوله Shenavar1969@gmail.com 100319475328460030437 100319475328460030437 No مؤسسه تحقیقات بین‌‌المللی تاسماهیان دریای خزر، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، رشت، ایران M. Ghiasi مریم قیاسی ghiasimaryam4@gmail.com 100319475328460030438 100319475328460030438 No پژوهشکده اکولوژی دریای خزر، موسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، ساری، ایران