fa مقاله علمی – پژوهشی:‌ جداسازی، تکثیر و انتقال ژن VP28 ویروس عامل لکه سفید میگو در میکروجلبک Chlorella vulgaris به روش الکتروپوریشن (تراواسازی الکتریکی) بهداشت و بيماريهاي آبزيان بهداشت بيماريها پژوهشي Research <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="tab-stops:right 5.75in"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">بیماری لکه‌سفید یکی از مهمترین بیماری‌ها در پرورش میگو می‌باشد که موجب کاهش تولید و خسارت اقتصادی شدیدی در کل دنیا </span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">از جمله ایران </span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">گردیده است. مرگ ‌و میر ناشی از این بیماری شدید و بسیار بالا و به 100% طی 10-3 روز از شروع بیماری می‌رسد.</span></span></span> <span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">بر اساس آمارهای جهانی سالانه در دنیا حدود 300 هزار تن میگو بر اثر این بیماری تلف می‌شود. </span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">برای مثال،</span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> در ایران در سال های 1386,1383, 1394,</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">1387</span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">، 1395 و 1398 شیوع این بیماری خسارات میلیاردی به تولید کنندگان وارد کرد</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">.</span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> با توجه به این‌که ژن پروتئین ویروسی </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">VP₂₈</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> یکی از مهم‌ترین پروتئین‌‌های پوششی ویروس بیماری لکه سفید و در چسبیدن و نفوذ به سلول‌های میگو نقش دارد</span></span></span> <span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">و از آن‌جایی‌که مهم‌ترین منبع غذایی میگو در مرحله لاروی میکروجلبک می‌باشد</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">، </span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">می‌تواند منبع مناسبی برای ساخت واکسن باشد</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">.</span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> در این تحقیق ژن </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">VP₂₈</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> به میکروجلبک انتقال داده شد تا از این راه کمکی در جهت تولید واکسن خوراکی برای جلوگیری از بیماری لکه‌‌سفیدمیگو انجام گیرد. در این تحقیق </span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">نمونه‌های میگو (</span></span></span><i><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Penaeus indicus</span></span></i><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">) مشکوک به بیماری سندروم لکه سفید از استخرهای پرورشی آبادان (مهرماه 1390) به آزمایشگاه مؤسسه واکسن و سرم‌سازی رازی-شعبه اراک منتقل و </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">DNA</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> ژنومیک ویروس با استفاده از روش پروتئیناز </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">K</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> و فنل/کلرفرم استخراج شد. با طراحی آغازگرهای اختصاصی ژن </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">VP₂₈</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> به روش </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">PCR</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> تکثیر و به داخل وکتور </span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">pCAMBIA1304</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black"> منتقل و نهایتاً طی فرایند تراواسازی الکتریکی به میکروجلبک </span></span></span><i><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Chlorella vulgaris</span></span></i><i> </i><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" compset="" style="font-family:"><span style="color:black">که خود یکی از میزبان‌های بسیار مناسب انتقال ژن می‌باشد، منتقل گردید.</span></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></span></span> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:17.0pt"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span lang="EN" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">White spot disease (WSD) is one of the most important diseases in shrimp farming, which has caused a decrease in production and severe economic damage all over the world, including Iran. </span></span></span><span lang="EN" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Mortality caused by this severe disease is very high and reaches 100% within 3 to 10 days from the onset of the disease</span></span></span><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">.</span></span></span><span lang="EN" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black"> According to global statistics, about 300,000 tons of shrimp are lost due to this disease every year in the world. For example, within the years 2004, 2006, 2007, 2015, 2016 and 2019, the outbreak of this disease caused millions of dollar losses to the producers in Iran. Since the VP28 viral protein gene is one of the most important white spot disease virus envelope proteins and plays a role in sticking to and penetrating shrimp cells, and since microalgae is the most important source of food for shrimp in the larval stage, So it can be a suitable host for making&nbsp; a vaccine. </span></span></span><span style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">So in this study, samples of shrimp (<i>Penaeus indicus</i>) suspected of white spot disease from Abadan (Khuzestan province) breeding ponds were transferred to the laboratory of Razi Vaccine and Serum Institute of Arak branch and the genomic DNA of the virus was extracted using proteinase K and phenol/chloroform methods. The VP28 gene was proliferated by PCR method, inserted into pCAMBIA1304 vector and finally transferred to <i>Chlorella vulgaris</i> microalgae using electroporation method.</span></span></span><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span> ژن VP28, لکه سفید میگو, میکروجلبک, کلرلاولگاریس, الکتروپوریشن VP28, white spot, Microalgae, Chlorella vulgaris, Electroporation 59 69 http://isfj.ir/browse.php?a_code=A-10-2626-1&slc_lang=fa&sid=1 seyed Davood Hosseini سید داود حسینی hosseinida@yahoo.com 100319475328460034569 100319475328460034569 Yes Razi Vaccine and Serum Research Institute. Agricultural, Research Education and Extension Organization (AREEO), Arak, Iran موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی Mohadesehosatad Hosseini محدثه السادات حسینی hadisda74@ymail.com 100319475328460034570 100319475328460034570 No دانشکده بیوتکنولوژی دانشگاه الزهرا seyed Mahdi Rezai سید مهدی رضایی fahud14@yahoo.com 100319475328460034571 100319475328460034571 No دانشگاه ساری ،استان مازنذران