fa مقاله علمی – پژوهشی:‌ بررسی تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال IgG در پاسخ به تزریق ویروس کشته شده سپتی‌سمی خونریزی دهنده (VHSv) ماهیان قزل‌آلای رنگین کمان (Oncorhyncus mykiss) در خرگوش Oryctolagus cuniculus به منظور تولید کیت تشخیص سریع بهداشت و بيماريهاي آبزيان بهداشت بيماريها پژوهشي Research <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:16.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">آبزی‌پروری به یکی از بخش‌های پایدار، دارای آینده‌ای روشن و امیدبخش برای تامین و تضمین امنیت غذای انسان تبدیل شده‌ که ب</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">i </span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">دلیل نیاز به افزایش تولید این غذای سلامتی، پرورش متراکمآبزیان&nbsp; مورد استقبال قرار گرفته است که این موضوع می‌‌تواند آبزیان را مستعد بیماری به‌خصوص انواع ویروسی کند. در سال‌های گذشته بیماری ویروسی </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">VHS</span></span><span b="" compset="" style="font-family:"> &nbsp;خسارات جبران‌ناپذیری به تولید کنندگان ماهی قزل‌آلای کشور وارد نمود . تشخیص سریع بیماری وحذف سریع ماهیان آلوده در مراحل اولیه بیماری، برای کنترل موثر شیوع بیماری و کاهش هدر رفت هزینه‌ها امری ضروری است که کیت‌های تشخیص سریع در این خصوص کاربرد خواهند داشت</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">.</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> این کیت‌ها بر پایه آنتی‌بادی ساخته می‌شوند که در این پروژه تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">IgG</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> علیه ویروس</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">VHS</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> در مدل حیوانی خرگوش نیوزلندی (</span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Oryctolagus cuniculus</span></span></i><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">) مورد تحقیق و بررسی قرار گرفت. بدین منظور، از استوک ویروس </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">VHSV-Ia</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> سویه&nbsp; </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">DK-5151</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> با کد بانک ژنی (</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">GenBank Accession No: AF345859</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">) تهیه شده از آزمایشگاه رفرنس اروپا پس از آماده‌سازی به عنوان آنتی‌ژن جهت تحریک سیستم ایمنی با آدجوانت کامل فروند در 4 تیمار شامل کنترل منفی آب مقطر، تیمار یک، با غلظت 1 سی‌سی ویروس کامل، تیمار دو، با غلظت&nbsp; 5/0 سی‌سی ویروس و 5/0 سی‌سی آدجوانت فروند، تیمار سه، با غلظت 75 صدم&nbsp; ویروس و 25 صدم آدجوانت، تیمار چهار با غلظت&nbsp; 25 صدم&nbsp; ویروس و 75 صدم آدجوانت، به مدت چهار ماه، هر ماه یکبار به صورت </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">IM</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> به 5 گروه سه تایی خرگوش‌های نیوزلندی تزریق، بعد از 15 روز، نسبت خون‌گیری از ورید کناری گوش &nbsp;اقدام و جذب نوری آنتی‌بادی (</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">OD</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">) اندازه‌گیری گردید که در طول 4 بار خونگیری میزان جذب نوری آنتی‌‌بادی </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">IgG</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> در بین گروه‌‌ها تفاوت معنی‌داری (</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">P<.0/05</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">) نشان داد. سپس تخلیص آنتی‌بادی از طریق ستون کروماتوگرافی جذبی پروتئین </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">G</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> سفارز فعال شده </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="background:white"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:#202124">Sepharose^&reg;&nbsp;4B</span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">) </span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">) انجام و </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">OD</span></span><span b="" compset="" style="font-family:"> آنتی‌‌بادی‌های تخلیص شده با دستگاه </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Nano 200- Ver1.0</span></span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:">&nbsp; در طول موج 280 نانومتر به‌ترتیب در تیمار دوم 60/2 و تیمار سوم 38/2 و غلظت آنتی‌بادی به‌‌ترتیب 15/0 </span><span lang="FA" new="" roman="" style="font-family:" times="">&plusmn;</span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> 82/1 و 12/0</span><span lang="FA" new="" roman="" style="font-family:" times="">&plusmn;</span><span b="" compset="" lang="FA" style="font-family:"> 67/1 میلی‌گرم در میلی‌‌لیتر محاسبه گردید. قرار است از این آنتی‌بادی در کیت تشخیص سریع &nbsp;این بیماری استفاده گردد.</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"></span></span></span></span></span></span></span> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:15.0pt"><span style="text-autospace:none"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Aquaculture has become one of the sustainable sectors with a bright and promising future to ensure the safety of human food. Due to the need to increase the production of this healthy food, intensive aquaculture has been welcomed, which causes many diseases, especially viral. In recent years, VHS virus has caused irreparable damage to the country&#39;s trout fish producers. Rapid diagnosis and elimination of infected fish in the early stages of the disease is essential to control the spread of the disease effectively and reduce cost wastage, and rapid diagnostic kits will be very useful. These kits are made out of &nbsp;antibodies. In this research, the production of polyclonal IgG antibodies against VHS virus was investigated in a New Zealand rabbit animal model(<i>Oractulagus cuniculus</i>). In order to this ,</span> <span new="" roman="" style="font-family:" times="">the stock of &nbsp;VHS GenBank Accession No: AF345859) Prepared by European Reference Laboratory as &nbsp;an antigen to stimulate the immune system with Freund&#39;s complete adjuvant in four treatments including negative control of distilled water, treatment one with a concentration of 1 cc virus Complete, treatment two with a concentration of 0.5cc virus and 0.5cc adjuvant Freund, treatment three with a concentration of 75% virus and 25% adjuvant, treatment four with a concentration of 25% virus and 75% adjuvant, for four months, once a month IM In 5 groups of New Zealand rabbits injected, after 15 days, the ratio of blood sampling from the peripheral vein and antibody absorption (OD) were measured. During 4 blood samples, the amount of IgG antibody absorption was significantly different between the groups P <0.05) showed. Antibody purification was then activated by Sepharose Protein G adsorption chromatography column 4B (Sepharose&reg;&nbsp;4B)</span> <span b="" dir="RTL" lang="FA" nazanin="" style="font-family:">)</span><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> and OD of antibodies purified by Nano-200-Ver1.0 at 280 nm in the second treatment were 2.60 and the third treatment was 2.38 and the antibody concentrations were 1.82 and 1.67 mg, respectively. This antibody is going to be used in the rapid diagnosis kit of this disease.</span></span></span></span></span> قزل‌آلای رنگین کمان, ویروس سپتی‌سمی خونریزی دهنده, آنتی‌بادی پلی‌کلونال, کیت تشخیص سریع Trout fish, Viral hemorrhagic septicemia, polyclonal antibody 69 80 http://isfj.ir/browse.php?a_code=A-10-2728-2&slc_lang=fa&sid=1 Masoumeh Hafezieh معصومه حافظیه Masoumehhafezieh@yahoo.com 2282324757 100319475328460034502 No دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، تهران-ایران Mohades Ghasemi محدث قاسمی mohades@yahoo.com 100319475328460034503 100319475328460034503 Yes Agricultural Research, Education and Extension Organization(AREEO),Tehran, Iran سازمان تحقیقات، اموزش و ترویج کشاورزی، تهران-ایران Shapour Kakoolaki شاپور کاکولکی bsh443@gmail.com 100319475328460034504 100319475328460034504 No Agricultural Research, Education and Extension Organization(AREEO), Tehran, Iran سازمان تحقیقات، اموزش و ترویج کشاورزی، تهران-ایران Reza Kazempour رضا کاظم پور rkbs_kh@yahoo.com 100319475328460034505 100319475328460034505 No Roodehen Branch, Islamic Azad University, Roodehen, Iran واحد رودهن، دانشگاه آزاد اسلامی، رودهن- ایزان